प्रयोगों की बुनियादी बातें
खाद्य प्रयोग एक सावधान जाँच है। सावधान यानी सुरक्षित, साफ़ और सटीक।
- सुरक्षा: चश्मा, दस्ताने और कोट पहनो। लंबे बाल बाँधो। प्रयोगशाला में कुछ भी चखो मत।
- साफ़ औज़ार: काँच के बर्तन धोकर सुखाओ। गंदा फ्लास्क उत्तर बिगाड़ देता है।
- तौलना: तराजू ग्राम (g) में द्रव्यमान बताता है। खाली बर्तन रखकर टेयर (शून्य) दबाओ।
- नमूना: पूरे खाने का छोटा प्रतिनिधि भाग। लेने से पहले अच्छी तरह मिलाओ।
- अभिलेख: तारीख़, नमूने का नाम, हर पाठ्यांक और इकाई लिखो। जाँच कम से कम दो बार दोहराओ।
रासायनिक प्रयोग: अनुमापन से अम्ल
अनुमापन से पता चलता है कि सिरका, रस या दही जैसे खाने में कितना अम्ल या क्षार है।
- फ्लास्क में नापा हुआ खाने का घोल रखो और सूचक की 2 बूँदें डालो।
- ब्यूरेट में ज्ञात सांद्रता का क्षार भरो (जैसे 0.1 M)।
- फ्लास्क घुमाते हुए क्षार धीरे-धीरे डालो।
- अंत-बिंदु पर रुको: पहला टिकाऊ गुलाबी रंग।
- कितने mL लगे, पढ़ो। इसी आयतन से अम्ल की मात्रा निकलती है।
अन्य रासायनिक जाँचें: pH मीटर से pH, ओवन में सुखाकर पानी की मात्रा, और नमक या चीनी की सरल जाँच।
सूक्ष्मजीव प्रयोग: प्लेट गिनती
सूक्ष्मजीव दिखते नहीं, पर बढ़कर कॉलोनी बनाते हैं जिन्हें गिना जा सकता है। एक कॉलोनी एक कोशिका या छोटे गुच्छे से बनती है, इसलिए हम CFU (कॉलोनी बनाने वाली इकाई) कहते हैं।
- 10 g खाना 90 mL निर्जीवाणु पानी में मिलाओ। यह 10-1 है।
- इसमें से 1 mL लेकर 9 mL पानी में डालो। यह 10-2 है। ऐसे 10-3, 10-4 बनाओ।
- हर नली का 1 mL अगार (सूक्ष्मजीवों का जेली भोजन) वाली प्लेट पर डालो। 1 से 2 दिन गरम रखो।
- जिस प्लेट पर 25 से 250 कॉलोनियाँ हों, वही गिनो। कम गिनती ठीक नहीं, ज़्यादा में भीड़ हो जाती है।
CFU प्रति ग्राम = गिनी कॉलोनियाँ × तनुता गुणांक। साफ़ (ऐसेप्टिक) तरीक़ा अपनाओ: लूप को लौ में गरम करो, ढक्कन बंद रखो, और इस्तेमाल की प्लेट प्रेशर कुकर या ऑटोक्लेव में मारकर फेंको।
मुख्य सूत्र और परिभाषाएँ
- तनुता गुणांक = 10<sup>n</sup> (10<sup>-n</sup> वाली नली के लिए)
- CFU/g = कॉलोनियाँ ÷ (प्लेट पर डाला आयतन mL × तनुता)
- क्षार के मोल = मोलरता × आयतन (लीटर में)
- अच्छी प्लेट की सीमा: 25 से 250 कॉलोनियाँ
हल किए गए उदाहरण
1. 25 g के बर्तन में 10 g नमूना तौलना है। टेयर न करो तो तराजू क्या दिखाएगा?
टेयर के बिना बर्तन + नमूना = 25 + 10 = 35 g। टेयर करने पर 10 g दिखता।
2. अनुमापन में 0.1 M क्षार के 8.0 mL से अंत-बिंदु आया। कितने मोल क्षार लगा?
आयतन = 8.0 mL = 0.008 L। मोल = 0.1 × 0.008 = 0.0008 mol। एक-अम्लीय खाने में यही अम्ल की मात्रा भी है।
3. 10<sup>-2</sup> प्लेट (1 mL डाला) पर 180 कॉलोनियाँ हैं। CFU प्रति ग्राम निकालो।
CFU/g = 180 × 100 = 18,000 = 1.8 × 10<sup>4</sup> CFU/g।
4. 10<sup>-3</sup> प्लेट की 18 कॉलोनियाँ क्यों नहीं ली जातीं?
ये 25 से कम हैं। बहुत कम गिनती सटीक नहीं होती, इसलिए 180 वाली 10<sup>-2</sup> प्लेट चुनो।
5. 10 g खाना 90 mL पानी में मिलाया, फिर उसका 1 mL 9 mL पानी में। अब तनुता क्या है?
पहली नली 10<sup>-1</sup>, दूसरी 10<sup>-2</sup>। यानी खाना 100 गुना पतला हुआ।
आम गलतियाँ
- तराजू शून्य न करना, जिससे बर्तन का वज़न नमूने में जुड़ जाता है।
- गुलाबी अंत-बिंदु से आगे निकल जाना। एक बूँद ज़्यादा भी उत्तर गलत कर देती है।
- बहुत ज़्यादा कॉलोनियों वाली प्लेट गिनना। 25 से 250 वाली चुनो।
- पाठ्यांक के साथ इकाई या तनुता लिखना भूल जाना।